จักรพงศ์ สังโชติ*, ธิดารัตน์ คุ้มสังข์, ชนภัทร นาคทับทิม, วิชชุดา พยุหกฤษ
งานวิจัยนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาเวลาที่เหมาะสมในการย้อมสีคอลลาเจนในเซลล์ไฟโบรบลาสต์โดยใช้ชุดสีย้อมสำเร็จรูปมาสซอนไตรโครมและอะนิลีนบลู ในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ 2 ชนิด ได้แก่ V-79 (Chinese hamster lung fibroblast) และ CCD18-co (Human colon fibroblast) ที่เพาะเลี้ยงในถาดเพาะเลี้ยง 6 หลุม (6-well plates) จากนั้นทำการย้อมสีคอลลาเจนในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ตามคู่มือชุดสีย้อมสาเร็จรูป Masson’s trichrome with aniline blue (Bio-Optica, Italy) เปรียบเทียบกับวิธีที่พัฒนาโดยการเพิ่มเวลาในการย้อมสีในขั้นตอนการย้อม Masson aniline blue จาก 5 นาที เป็น 10 20 และ 30 นาที ผลการทดลองพบว่า วิธีการในคู่มือชุดสีย้อมสาเร็จรูปที่ขั้นตอนการย้อม Masson aniline blue เป็นเวลา 5 นาที ไม่สามารถย้อมติดคอลลาเจนได้ในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ทั้ง 2 ชนิด โดยพบเพียงสีชมพูภายในไซโตพลาซึม เมื่อเพิ่มเวลาในการย้อมให้นานขึ้นพบว่าผลจากการย้อมที่เวลา 10 และ 20 นาที พบสีแดงเข้มและม่วงตามลาดับ และเมื่อเพิ่มเวลาเป็น 30 นาที พบว่า คอลลาเจนติดสีน้าเงินเข้มอย่างชัดเจนในเซลล์ทั้งสองชนิด ผลการวิจัยพบว่าวิธีที่พัฒนาจากวิธีการย้อมสีมาสซอนไตรโครมและอะนิลีนบลูโดยการเพิ่มระยะเวลาการย้อมเป็น 30 นาที ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการย้อมคอลลาเจนภายในเซลล์ได้ วิธีที่พัฒนาขึ้นดังกล่าวนี้สามารถช่วยสนับสนุนในการศึกษาและงานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับการศึกษาการสร้างคอลลาเจนในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ในระดับเบื้องต้นได้
ที่อยู่ | : ภาควิชาพยาธิชีววิทยา คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยมหิดล 272 ถนน พระราม6 แขวง ทุ่งพญาไท เขตราชเทวี กรุงเทพมหานคร 10400 |
เบอร์โทร | : 02 201 5550 |
อีเมล์ | : Mahidol@Mahidol.ac.th |